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La técnica TGGE (Temperature Gradient
Gel Electrophoresis), o electroforesis en gel en gradiente de
temperatura, es un método de análisis molecular que permite
detectar fragmentos de ADN que difieren incluso en un par de bases.
A diferencia de otros
métodos de electroforesis en gel, en los que los fragmentos de
ADN son separados por su tamaño o por su carga, en esta técnica,
fragmentos del mismo tamaño son separadas por su momento de desnaturalización
(conversión del ADN de doble cadena en hebras simples). Cuando
el ADN se somete a un ambiente desnaturalizante (por ejemplo elevadas
temperaturas), se desnaturaliza parcialmente, hasta disociarse en sus
dos hebras cuando aumenta suficientemente la temperatura. Como consecuencia,
la velocidad de migración en el gel se ralentiza. La posición
en el gel donde los fragmentos de dsDNA se desnaturalizan y se convierten
en ssDNA (y casi se detienen), depende de su secuencia de nucleótidos.
Diferentes secuencias de nucleótidos, en fragmentos de ADN del
mismo tamaño, darán lugar a diferentes posiciones en el
gel. Por eso este método es muy eficaz separando fragmentos de
ADN del mismo tamaño, o productos de PCR basados en secuencia.

Comparando el comportamiento
de moléculas de DNA polimórficas, unos al lado de otros
en el mismo gel con gradiente de temperatura, es posible detectar aquellos
fragmentos que tienen mutaciones.
Existe una variación de este método, el DGGE, que utiliza
como gradiente desnaturalizante un agente químico, en vez de la
temperatura; las condiciones son más difíciles de reproducir
en distintas pruebas que con la utilización del gradiente de temperatura.

El gradiente de temperatura
en el gel se puede aplicar en paralelo (análisis rápidos
de varias muestras) o en perpendicular.
No dude en utilizar nuestro
formulario de contacto si desea cualquier tipo
de aclaración en lo referente a estas técnicas o en su aplicación.
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